miR495、miR551a靶向干扰SGC7901细胞PRL-3基因的表达
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【作 者】:
【摘 要】目的: 构建靶向PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a真核表达载体, 观察其转染胃癌SGC7901细胞后对胃癌细胞PRL-3基因表达的影响. 方法: 设计并合成两条针对PRL-3基因的特异性miRNA495和miRNA551a干扰序列, 分别与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体连接, 转化大肠杆菌, 纯化并鉴定后利用LipofectamineTM2000转染胃癌SGC7901细胞, 实时定量PCR及Western blot技术鉴定重组体对PRL-3基因表达的干扰效果. 结果: 针对PRL-3基因的miRNA495和miRNA 551a干扰质粒构建成功, 胃癌SGC7901细胞分别转染两种质粒后miRNA495及miRNA551a的表达明显升高, 并且明显抑制了PRL-3基因 mRNA及蛋白的表达. 结论: 靶向PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a真核表达载体构建成功, 其可有效提高胃癌SGC7901细胞miRNA495和miRNA551a的表达, 并抑制PRL-3 mRNA及PRL-3蛋白的表达.
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