人肠道病毒71型VP1和VP4的抗原融合表达及鉴定
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【摘 要】目的:构建人肠道病毒71型(humanenterovirus71,EV71)VPl一VP4重组融合蛋白表达体系.方法:构建EV71VPl-VP4重组融合蛋白原核表达栽体转化大肠杆菌DH5ct,诱导表达融合蛋白VP1-VP4,SDS-PAGE和Westernblot法进行鉴定.用融和蛋白包被ELISA板检测41例已知血清.结果:重组片段vPl-VP4测序结果与设计目的片段序列相符,重组载体构建成功:SDS-PAGE显示融合蛋白约42.8kDa,与预期值一致:Westernblots示该融合蛋白可以和EV71VPl、VP4抗体特异性结合.融合蛋白包被ELISA板能准确检测出4l例血清中16例EV71阳性血清,与CAl6无交叉反应.结论:表达的EV71VPl-VP4融合蛋白具有良好的抗原性,可作为EV71感染检测抗原,为EV71诊断试剂和疫苗的研究奠定实验基础.
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