MiR-130a靶向调控CYLD基因及其对肝癌细胞增殖的影响
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【摘 要】目的: 检测microRNA-130a(miR-130a)在肝癌中的表达水平及其对CYLD基因表达的调控, 并探讨miR-130a对肝癌细胞增殖的影响. 方法: 采用qRT-PCR检测miR-130a在原发性肝癌组织及对应的癌旁组织、肝癌细胞系和正常肝细胞中的表达差异, 利用靶基因预测分析软件预测miR-130a潜在靶基因CYLD后, 构建携带靶基因CYLD野生型及突变型3'UTR序列的双荧光素酶报告基因质粒, 应用双荧光素酶报告基因实验体系进行验证; 采用miR-130a抑制剂下调肝癌细胞系HepG2中miR-130a的表达, Western blot检测CYLD蛋白的表达变化; MTT法检测肝癌细胞增殖的改变. 结果: MiR-130a在原发性肝癌组织中的表达明显高于对应的癌旁组织(P〈0.05), 在肝癌细胞系中的表达也显著高于正常肝细胞(P〈0.05); 双荧光素酶报告基因系统验证CYLD是miR-130a的直接靶基因; HepG2细胞中转染miR-130a抑制剂下调miR-130a表达后. Western blot检测结果显示CYLD蛋白表达水平显著上调; miR-130a抑制剂转染的HepG2细胞其增殖受到明显抑制. 结论: MiR-130a在肝癌中表达上调, 下调miR-130a后可以促进靶基因CYLD的表达, 并可以抑制肝癌细胞的增殖活性, miR-130a有可能成为原发性肝癌治疗的新靶点.
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