塞来昔布对胃癌MGC-803细胞RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响
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【摘 要】目的:研究非甾体类抗炎药(NSAID)塞来昔布对胃癌细胞MGC-803的抑制作用和对RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响,以探讨塞来昔布的抗肿瘤机制.方法:培养胃癌MGC-803细胞,实验用不同浓度的塞来昔布(25、50、100μg/L)分别处理MGC-803细胞不同时间(12、24h、48h),无血清培养基饥饿24h达同步化后,MTT(噻唑蓝比色法)观察MGC-803细胞增殖;RT-PCR法检测细胞周期调控因子MMP-9、MMP-2、RECKmRNA的表达:Westernblot法检测MMP-9、MMP.2、RECKmRNA蛋白的表达.结果:MTT法显示塞来昔布能抑制胃癌MGC-803细胞增殖,作用12h时,随着塞来昔布处理浓度的增高,其抑制作用不明显,组间比较差异不显著(P>0.05),在作用24、48h时呈浓度依赖性(25-100μg/L),在25、50、100μg/L作用浓度呈时间依赖性(24-48h).塞来昔布在100μg/L浓度作用细胞48h时抑制.RTPcR法检测结果显示,在12h的作用时间点,随着塞来昔布处理浓度的增高,RECK基因及MMP-2、MMP-9mRNA变化不是很明显.组间比较无显著差异(P>0.05),在12h后,塞来昔布能增加胃癌细胞RECKmRNA和蛋白表达,作用呈浓度(25-100μg/L)和时间依赖性(24-48h1,MMP-2、MMP-9表达则下降.Westernblot法检测结果显示,作用12h时,随着塞来昔布处理浓度的增高,其RECK蛋白及MMP-2,MMP-9蛋白改变不明显,组间比较差异不显著(P〉0.05),在12hvX后,塞来昔布能增加RECKmRNA和蛋白表达并减少MMP-2、MMP-9表达,且作用呈浓度依赖性和时间依赖.结论:塞来昔布可抑制人胃癌MGC-803细胞增殖与转移;其可能是通过上调RECK基因,进而下调MMP-2、MMP-9来抑制胃癌细胞MGC-803的增殖与转移.
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