HSP90α的表达对食管癌细胞侵袭转移能力的影响
【出 处】:
【作 者】:
【摘 要】目的:探讨热休克蛋白90α(heat shock protein 90α,HSP90α)在食管癌(esophageal carcinoma,EC)细胞侵袭转移中的作用机制.方法:分别采用RT-PCR和Western blot检测HSP90α在具有不同侵袭转移潜能的EC细胞株CE81T-0和CE81T-4中mRNA水平和蛋白质水平的表达差异;细胞转染技术将siRNA-HSP90α转染入CE81T-4细胞中,并分为实验组、阴性对照组、空白对照组;并用RT-PCR和Western blot检测3组细胞中HSP90αmRNA水平和蛋白质水平的表达差异,验证是否转染成功.MTT法检测3组细胞的增殖活力,流式细胞术分析细胞周期、凋亡的改变,划痕实验和Transwell体外侵袭实验检测转染后CE81T-4细胞迁移和侵袭的变化.结果:CE81T-4细胞中的HSP90α的mRNA和蛋白质表达水平明显高于CE81T-0细胞(P〈0.05);siRNA-HSP90α成功转染CE81T-4细胞后,RT-PCR和Western blot检测3组结果显示,实验组中HSP90αmRNA水平和蛋白水平表达量显著低于空白对照组和阴性对照组(P〈0.05);MTT实验结果显示,实验组细胞的增殖能力明显减弱,与其他两组比较差异具有统计学意义(P〈0.05);HSP90α基因表达沉默后,细胞凋亡率为32.67%,较空白对照组和阴性对照组明显增加(P〈0.05);实验组细胞周期被阻滞在G0/G1期;Transwell体外侵袭实验显示实验组侵袭迁移的细胞数显著低于空白照组与阴性对照组(P〈0.05);划痕实验结果显示,72 h后实验组细胞的迁移力较其他两组明显降低.结论:HSP90α的下调会降低EC细胞的转移侵袭能力.
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