乳鼠结肠组织体外培养过程中TGF-β1对上皮细胞极性特征的影响
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【作 者】:
【摘 要】目的:建立乳鼠结肠组织器官培养体系,分析转化生长因子β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)对组织上皮细胞表面极性特征的影响.方法:在乳鼠结肠组织器官培养过程中添加10ng/mL TGF-β1干预48 h后,采用免疫组织化学、RT-PCR技术检测培养组(无添加TGF-β1)和干预组结肠组织中Crumbs3、E-cadherin、α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)的表达分布变化.结果:贴壁培养48 h后,可见培养组(无添加TGF-β1)组织块周围有铺路石样细胞爬满培养板,Crumbs3主要表达在上皮细胞顶端膜位置(P〈0.01),E-cadherin主要表达在结肠组织黏膜上皮层,α-SMA沿隐窝轴单层表达和少量表达在平滑肌层.而添加TGF-β1干预后的结肠组织周边细胞形态大小不一,E-cadherin主要表达在细胞质,并呈低表达(P〈0.05),α-SMA则大量表达在活化态的肌成纤维细胞和间充质中(P〈0.01).培养组E-cadherin、Crumbs3的mRNA的表达量在48 h后明显低于干预组(P〈0.05),而干预组中α-SMA的mRNA表达高于培养组(P〈0.01).结论:TGF-β1可诱导乳鼠结肠上皮细胞极性蛋白Crumbs3的表达下降并导致肠上皮细胞表型的改变。