稳定沉默CD14胃腺癌SGC-7901细胞体系的构建
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【摘 要】目的:观察CD14-shRNA慢病毒载体转染SGC-7901细胞后CD14 mRNA及蛋白变化,为胃癌发病机制的研究奠定实验基础.方法:将构建好的CD14-shRNA慢病毒载体,转染SGC-7901细胞后,用Real-time PCR和Western blot分别检测空白对照组、NC-CD14shRNA阴性对照组及CD14-shRNA慢病毒载体组的CD14 mRNA和蛋白质的表达.结果:CD14-shRNA慢病毒载体成功转染至胃癌细胞系,RT-PCR结果显示转染CD14-shRNA慢病毒组CD14的2Ct值(1±0.08)比NCshRNA对照组2C t值(0.16±0.02)降低(P=0.0001;P〈0.001),差异有统计学意义;Western blot检测结果显示,CD14-shRNA慢病毒组CD14蛋白相对表达量为0.01,远远小于SGC-7901空白组(1.00)及NCshRNA阴性对照组(0.83).结论:CD14-shRNA慢病毒载体转染至胃癌SGC-7901细胞后能抑制胃癌细胞CD14 mRNA及蛋白表达,CD14在胃癌发生、发展中具有重要作用,有望为胃癌防治提供新的思路.
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