番木瓜种子提取物异硫氰酸苄酯对肝癌细胞凋亡的影响
【出 处】:
【作 者】:
【摘 要】目的:通过异硫氰酸苄酯(benzyl-isothiocyanate,BITC)对体外培养的人肝癌细胞株HLE和Bel7402的凋亡影响,初步探讨BITC调控肝癌细胞凋亡的可能机制.方法:3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)染色法检测不同浓度BITC对肝癌细胞增殖的影响;选择具有抑制肝癌细胞生长的BITC浓度处理肝癌细胞后4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)染色法进行凋亡的形态学观察;Caspase3酶活性检测试剂盒检测细胞中的Caspase3酶活性;Western blot法检测具代表性的凋亡相关蛋白Caspase8和Caspase3,细胞周期相关蛋白Cyclin D1的表达.结果:MTT结果显示BITC对人肝癌细胞的增殖有明显的抑制作用,用浓度为40μmol/L的BITC处理时,HLE和Bel 7402细胞存活率分别为71.56%和78.09%,和对照组比较,有统计学差异(P〈0.05);当用浓度为80μmol/L的BITC处理时,HLE和Bel 7402生长率分别为32.91%和53.06%,和对照组比较,有统计学显著性差异(P〈0.01);经BITC处理后的细胞,DAPI染色显示细胞特征性凋亡变化;Western blot和Caspase活性检测结果显示,随着BITC浓度增加,Caspase8和Caspase3蛋白表达水平及活性呈上升趋势,而细胞周期蛋白Cyclin D1的表达则明显下降.结论:BITC对人肝癌细胞增殖有抑制作用,并能诱导肝癌细胞凋亡;BITC通过激活Caspase8和Caspase3信号途径以及抑制细胞周期进展诱导细胞凋亡.
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