下调缺氧诱导因子-1表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响
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【摘 要】目的:观察肝癌缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1)表达及靶向其基因转录对肝癌细胞增殖的影响.方法:以自身配对法收集术后肝癌及癌周组织,免疫组织化学染色法分析HIF-1胞内表达及分布;按照HIF-1基因序列合成miRNA,筛选干扰效率最佳者转染肝癌(HepG2)细胞,以荧光定量-PCR和Western blot分别检测HIF-1转录和蛋白表达;并以miRNA转染联合阿霉素后,流式细胞仪检测沉默细胞中HIF-1对HepG2细胞增殖的影响.结果:肝癌及癌周组织HIF-1表达呈棕黄色颗粒状,位于胞浆和部分胞核,呈均匀表达,中央静脉周围明显;其阳性率癌组织为80%,低于癌旁100%表达(2=22.35,P〈0.001);与瘤体大小和分化程度相关;HepG2细胞经miRNA干扰后,HIF-1在RNA和蛋白水平分别下降87%和56%,发生细胞凋亡(22.46%±0.61%)和G1期阻滞(61.49%±1.12%,P〈0.01);加入阿霉素后细胞凋亡率和G1期细胞分别增至36.99%±0.88%和65.68%±0.91%.结论:HIF-1过表达与肝癌密切相关,以特异性miRNA靶向HIF-1,可调控细胞周期,通过加速凋亡的机制抑制癌细胞增殖.
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