胞质转导肽一HBcAgl8-27—Tapasin体外诱导HBV转基因小鼠髓源性树突状细胞成熟及在T淋巴细胞增殖中的作用
【出 处】:
【作 者】:
【摘 要】目的:观察融合蛋白胞质转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)-HBcAgl8-27-Tapasin体外诱导HBV转基因小鼠髓源性树突状细胞(dendriticcell,DC)成熟和对T淋巴细胞增殖的作用.方法:体外分离、培养HBV转基因小鼠及近交系C57BL/6小鼠髓源性DC.加入重组粒细胞.巨噬细胞集落刺激因子和白介素(interleukin,IL).4培养5d,再加入实验组10μg/mLCTP—HBcAgl8-27-Tapasin、对照组10μg/mLCTP—HBcAgl8.27、10μg/mLHBcAgl8—27一Tapasin及空白组RPMI1640完全培养液.流式细胞术测定DC表面分子CD80、CD83、MHC.1的表达,ELISA法测定DC培养上清液中的IL.121070的水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测T淋巴细胞增殖反应,流式细胞仪检测增殖的T淋巴细胞内的细胞因子.结果:体外成功诱导小鼠髓源性DC;CTP—HBcAg限27-Tapasin能明显上调DC表面分子CD80、CD83、MHC.1的表达:并且CTP—HBcAg博27.Tapasin组诱导DC分泌的IL一12p70水平及诱导DC增殖T淋巴细胞增殖能力明显高于对照组及空白组[IL.12p70转基因小鼠旷=205.85,P=0.000);C57BL/6小鼠伊=406.20,P=O.000)1;流式细胞仪检测实验组融合蛋白诱导的CTL水平也高于对照组『转基因小鼠旷=155.45,P=0.000);C57BL/6,小鼠(F=392.90,P=0.000)],同时HBV转基因小鼠DC表面分子及在T淋巴细胞增殖中的作用要比C57BL/6小鼠低.结论:分子伴侣Tapasin修饰胞内化抗原肽能促进HBV转基因小鼠髓源性DC的分化、成熟,并能增强DC刺激T淋巴细胞增殖能力及诱导CTL的产生.
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