siRNA沉默月以31表达对胰腺癌PANC-1细胞增殖的抑制作用
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【摘 要】目的:观察s讧斟A沉默核糖体蛋白L31mbosonlalproteinL31,RPL31)基因表达对人胰腺癌PANC-1细胞的影响.方法:针对RPL31基因设计了3条siRNA.使用脂质体LipOfectamineTM2000转染人胰腺癌PANC-1细胞,同时设立空白对照组和阴性对照组,转染成功后通过实时定量PCR及Westernblot分别从mRNA和蛋白水平检测RNA干扰沉默RPL31-基因的效果,四氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖。流式细胞术检测细胞周期分布,Transwell小室检测细胞迁移,ELISA检测血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达.结果:转染48h后,3条SiRNA能显著抑制RPL31基因mRNA和蛋白的表达:MTT结果显示。PANC-1细胞增殖明显受到抑制:细胞周期分布中G0/G,期明显增加、S期减少(G0/G1:59.85%±5.47%VS45.71%±3.44%:S:28.63%±4.52%VS45.13%±2.64%,均P〈0.051:转染后细胞迁移数目(178.6个±30.3个1较空白对照组(470.5个±22.8个1与阴性对照组(474.2个±20.4个)明显减少,差异显著(P〈0.05);转染后PANC-1细胞的VEGF表达量也明显减少[1563.45pg/(106cell·24h1±24.95pg/(106cell·24h)VS2804.6pg/(106cell·24h1±40.46pg/(106cell·24h),2791.5pg/(106cell·24h)±44.77pg/(106cell·24h)].结论:RPL31siRNA能明显抑制PANC-1细胞RPL31的表达,抑制细胞增殖,降低细胞迁移及VEGF表达,RPL31基因有可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点.